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實驗6-抗病毒感染-

2023-04-10

甘草多糖免疫學實驗研究解讀（六）

甘草多糖抗病毒感染實驗

于長水

 

甘草多糖提純后，成為非特異免疫原性新物質。在研發過程中，在投入市場應用前，在動物中實驗觀察了甘草多糖抗病毒作用。

實驗由天津醫科大學微生物教研室進行。

實驗材料與方法：

由于病毒只能在活的細胞內生長，選用小鼠傳代纖維母細胞培養病毒。

病毒則以呼吸道病毒——腺病毒，腸道病毒——柯薩奇病毒做實驗。

每種病毒分四個組，甘草多糖分為1:4、1:8、1:16、1:32四個稀釋度，稀釋度越高，含甘草多糖量越低。

  • 甘草多糖對細胞毒性測定

病毒在組織細胞生長對照

甘草多糖是否對細胞具有毒性，細胞是否適于病毒生長，都應該先做預試驗，以保證正式實驗結果的可靠性。

在細胞液中加入不同稀釋度甘草多糖，培養48小時后觀察，結果細胞形態正常均無變化。

病毒在細胞液中生長良好，均出現細胞病變。

結果解讀：

表一、甘草多糖對細胞的毒性作用測定、病毒在細胞中生長對照

實驗組             細胞對照             病毒對照

1:4                ——               ——                 ++++

1:8                ——               ——                 ++++

1:16               ——               ——                 ++++

1:32               ——               ——                 ++++

從表一可明顯看出，甘草多糖不同稀釋度溶液對細胞均無毒性。對照病毒生長良好，細胞適宜病毒生長。

據此，可進行正式實驗。

  • 分組實驗

1組：在細胞中，先加入不同稀釋度甘草多糖液，24小時后吸出甘草多糖液，加入病毒液。

2組：在細胞中，先加入病毒液，1小時后，洗去病毒液，加入不同稀釋度甘草多糖液。

3組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液同時加入細胞液中。

4組：不同稀釋度甘草多糖液與病毒液混合，放置37℃培養2小時后，再加入細胞液中。

相同的分組與相同的方法，分別對腺病毒、柯薩奇病毒做了實驗觀察。

 

 

表二、甘草多糖對腺病毒感染保護率（%）

1:4      1:8     1:16      1:32    病毒對照     甘草多糖對照     細胞對照

1     67.5     64.9    70.3      74.5     ++++        ——             ——

2     14       5.3     6.0       10.0     ++++        ——             ——

3     60       49.4    48.9      42.5     ++++        ——             ——

4     45.3     43.5    49.6      47.4      ++++        ——             ——

 

 

表三、甘草多糖對柯薩奇病毒感染保護率（%）

1:4     1:8     1:16     1:32     病毒對照    甘草多糖對照    細胞對照

1     55.5    64.5    57.6     59.0      ++++        ——            ——

2     50.0    43.4    45.2     39.1      ++++        ——            ——

3     42.5    39.3    35.4     43.9      ++++        ——            ——

4     47.7    40.9    47.7     42.6      ++++        ——            ——

 

從表二、表三可看出，甘草多糖對腺病毒、柯薩奇病毒均有阻止病毒進入細胞造成感染的功能作用。

還觀察到，甘草多糖對這兩種病毒均有直接的滅活作用（即殺滅病毒）。

呼吸道病毒和腸道病毒，都是經常感染人的致病病毒，而且對于病毒目前還缺乏理想的高效治療藥物。

腺病毒是一群多型的病毒，主要經上呼吸道侵入人體，也可經眼結膜侵入，引起的疾病包括：急性上呼吸道感染、急性喉炎、咽結膜熱、流行性角膜結膜炎、非典型肺炎等癥。侵犯兒童和中老年人。

柯薩奇病毒是一群多型的病毒，主要通過腸道感染，可引起無菌性腦膜炎、流行性胸痛、夏季感冒、咽峽炎、心肌炎、麻痹癥等。這群病毒對外環境的抵抗力較強。